|
Ürün ayrıntıları:
|
| Ürün adı: | Monkeypox Virus Real Time PCR Kiti (PCR-Floresan Problama) | Algılama Kanalları: | dostum |
|---|---|---|---|
| IC: | VIC | Ct Değeri: | 35 |
| Depolamak: | -20℃±5℃ | LOD: | 200 kopya/mL |
| Bileşenler: | PCR Reaksiyon Tamponu, PCR Enzim Karışımı, Pozitif kontrol, Negatif kontrol | Örnek tip: | Nazal sürüntüler, orofaringeal sürüntü, tükürük, idrar, lezyon dokusu, eksüda ve kan vb. |
| Vurgulamak: | FAM Monkeypox PCR Test Kiti,Real Time Monkeypox PCR Test Kiti,Monkeypox FAM Real Time PCR Kiti |
||
Monkeypox Virus Real Time PCR Kiti (PCR-Floresan Problama)
Monkeypox, Monkeypox virüsünün (MPV) neden olduğu deri döküntüleri ile karakterize ve klinik semptomları çiçek hastalığına benzer olan, nadir görülen zoonotik bir hastalıktır.Vücut sıvıları ile temas yoluyla, ciltte veya ağız veya boğaz gibi iç mukozal yüzeylerde lezyonlar, solunum damlacıkları ve kontamine nesnelerle bulaşabilir.Viral DNA'nın polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ile tespiti, maymun çiçeği için tercih edilen testtir.
Monkeypox Virus Real Time PCR Kit, gerçek zamanlı PCR teknolojisine dayanmaktadır.Nazal sürüntüler, orofaringeal sürüntü, tükürük, idrar, cilt lezyonu dokusu, eksüda ve kan gibi klinik örneklerden çıkarılan maymun çiçeği virüsü nükleik asitlerinin kalitatif tespiti için uygundur.
Şartname
| Ürün adı | Monkeypox Virüsü Gerçek Zamanlı PCR Kiti |
| Algılama Kanalları | dostum |
| IC | VIC |
| Ct Değeri | 35 |
| Algılama limiti | 200 Kopya/mL |
| Depolamak | -20℃±5℃ |
| Toplu taşıma | Donmuş durumda |
| Raf ömrü | 12 ay |
| Örnek tip | Nazal sürüntüler, orofaringeal sürüntü, tükürük, idrar, lezyon dokusu, eksüda ve kan vb. |
| paket | 24 Test/Kit,48 Test/Kit,96 Test/Kit |
| Bileşenler | PCR Reaksiyon Tamponu, PCR Enzim Karışımı, Pozitif kontrol, Negatif kontrol |
TEST PRENSİBİ
Bu kit, İnsan serumu, lezyon eksüda örnekleri ve sürüntü örnekleri gibi klinik örneklerden ekstrakte edilen maymun çiçeği virüsünün nükleik asit tespiti için uygun olan gerçek zamanlı floresan PCR teknolojisini kullanır. maymun çiçeği virüsü nükleik asidi, PCR amplifikasyonu ile üretilen floresan sinyali toplanarak kalitatif olarak saptanabilir.
Ek olarak, her reaksiyon sistemine insan klinik numune tespiti için dahili standart kontrolü için spesifik primerler ve floresan problar eklenir ve test sonucunun yanlış negatif olduğunu gösterecek şekilde ölçülecek numunenin toplanması, taşınması ve ekstraksiyon süreci izlenir. .
Gerçek Zamanlı PCR Sistemi: Molarray MA-6000, ABI 7500, ViiATM 7, QuantStudio 5, QuantStudio 6/7 pro, QuantStudio 6/7 flex, Agilent Mx3000P/3005P, Rotor-GeneTM 6000/Q, Bio-Rad CFX96 TouchTM/ iQTM 5,Hongshi SLAN-96S/96P, AGS8830, AGS4800.
BİLEŞENLER
| Özellikler | LQ-000301 24T |
LQ-00302 48T |
LQ-000303 96T |
| PCR Reaksiyon Tamponu | 336μL × 1 tüp | 672μL × 1 tüp | 672μL × 2 tüp |
| PCR Enzim Karışımı | 30μL × 1 tüp | 50μL × 1 tüp | 100μL × 1 tüp |
| Pozitif kontrol | 50μL × 1 tüp | 100μL × 1 tüp | 200μL × 1 tüp |
| Negatif kontrol | 50μL × 1 tüp | 100μL × 1 tüp | 200μL × 1 tüp |
| Kullanım talimatı (adet) | 1 | 1 | 1 |
ÜRÜN PERFORMANS ENDEKSİ
1. Hassasiyet: 200 kopya/mL.
2. Özgüllük: Enterovirüs (EV), Kızamık virüsü (MV), Kızamıkçık virüsü (RV), Varicella-zoster virüsü (VZV), Dang virüsü (DenV), İnsan Parvovirüs B19(HPVB19), Epstein-barr virüsü ile çapraz reaksiyon yok (EBv), insan herpes virüsü 6(HHV-6) vb.
3. Hassasiyet: CV ≤ %5.
PROSEDÜRLER
1. Numune hazırlıkları
Klinik örneklerden DNA ekstraksiyonu, virüs DNA ekstraksiyon kitindeki ilgili gerekliliklere ve prosedürlere göre gerçekleştirilir.çıkarılan
DNA, tespit için doğrudan kullanılabilir.Numune ekstraksiyondan hemen sonra saptanmazsa, tekrarlanan donma-çözülme döngülerinden kaçınarak bekleme için -70°C'de saklanmalıdır.
2. Reaksiyon sistemi hazırlığı
(1) Sistem hazırlığı: Reaktifi kitten çıkarın ve oda sıcaklığında tamamen çözülmesine izin verin.Karışımı ters çevirin ve hemen santrifüjleyin.N test reaksiyonu (N = test edilecek numune sayısı + pozitif kontrol + negatif kontrol + 1) reaksiyon sistemleri için sırasıyla aşağıdaki gibi hazırlanır.
| Bileşenler | 1 reaksiyon sistemi için hacim | N reaksiyon sistemi için hacim |
| PCR reaksiyon tamponu | 14μL | 14μLx N |
| PCR Enzim karışımı | 1μL | 1μLx N |
| Toplam ses | 15μL | 15μLx N |
(2) Reaksiyon sistemi dağılımı: Yukarıdaki reaksiyon tamponunu iyice karıştırın, santrifüjleyin ve 15μL'lik alikuotları floresan PCR cihazı için uygun PCR tüplerine dağıtın.(PCR tüplerini 30 saniye boyunca 6.000 rpm'de santrifüjleyin ve numune tedavi bölgesine nakledin.)
3. Numune yükleme (Numune işleme bölgesi)
Yukarıdaki PCR tüplerine sırasıyla 10μL nükleik asit numunesi, negatif kontrol ve pozitif kontrol ekleyin.Tüpleri sıkıca kapatın ve 6.000 rpm'de 10 saniye santrifüjleyin ve ardından PCR amplifikasyon bölgesine taşıyın.
* Önlem: Aşağıdaki sırayla numune eklemek
önerilen: negatif kontrol-> nükleik asit numunesi -> pozitif kontrol.
4. PCR amplifikasyonu (PCR amplifikasyon bölgesi)
4.1 Amplifikasyon için kapaklı PCR tüplerini gerçek zamanlı PCR makinesine koyun.
4.2 Floresan PCR döngüsü koşulu ayarı
| programı | Sıcaklık | Reaksiyon süresi | Döngü sayısı |
|
1 |
50°C | 2 dakika | 1 |
| 2 | 95 °C | 2s | 1 |
| 3 | 95 °C | 1s | 41 |
| 60°C | 13s/20s/35s |
Adım 3:60℃'de floresan sinyallerini toplayın;ABI 7500 için 35s, SLAN-96S/96P için 20s, diğer Gerçek Zamanlı PCR Sistemleri için 13s.Toplam hacim: 25μL.
4.3 Tespitten sonra imha etme
Reaksiyondan sonra PCR tüplerini kapalı bir torbaya atın ve kullanılmış tüpleri tıbbi atık olarak değerlendirin.
5. Sonuç analizi için ayarlar
Taban çizgisini, tüm numunelerin floresan sinyallerinin nispeten kararlı olduğu (tüm numunelerde önemli dalgalanmaların olmadığı) üstel amplifikasyondan önceki bir bölgeye ayarlayın;başlangıç noktasını (döngü numarası) başlangıçtaki sinyal dalgalanmalarından uzağa ayarlayın
floresan toplama aşaması;üstel amplifikasyona girmek için ilk örneğin Ct'sinden önce bitiş noktasını (döngü numarası) 1~3 döngü ayarlayın.4~15 döngü önerilir.
Negatif kontrol amplifikasyon eğrisinin (düzensiz gürültü eğrisi) en yüksek noktasının hemen üzerinde eşiği ayarlayın.
6. Kalite kontrol kriterleri
Numune sonuçlarını değerlendirmeden önce, Pozitif Kontrol ve Negatif Kontrol aşağıdaki yorumlama tablosu kullanılarak yorumlanmalı ve Pozitif Kontrol ve Negatif Kontrol eğrisi doğru bir şekilde gerçekleştirilmelidir, aksi takdirde numune sonucu geçersizdir.
| Kanallar/ Kontroller |
Döngü eşiği(Ct)değeri | |
| dostum | VIC | |
| Pozitif kontrol | Ct > 40 veya UNDET | Ct > 40 veya UNDET |
| Negatif kontrol | Ct ≤ 35 | Ct ≤ 35 |
7. Test Sonuçlarının Yorumlanması
Monkeypox Virus için FAM kanalları, tespit sonucu aşağıdaki gibi yorumlanmalıdır.
a) Pozitif: Ct ≤ 38 ve amplifikasyon eğrisi S şeklindedir.
b) Şüpheli: 38 < Ct ≤ 40 ve amplifikasyon eğrisi S şeklinde, ikinci bir test gerekiyor.İkinci test için Ct ≤ 40 ve amplifikasyon eğrisi S-şekilli ise pozitif kabul edin.İkinci test için VIC kanalında Ct > 40 veya boş Ct ve Ct ≤ 35 ise negatif kabul edilir.
c) Negatif: VIC kanalında Ct > 40 veya null Ct ve Ct ≤ 35.
d) Yeniden test: VIC kanalında Ct > 40 veya null Ct ve Ct > 35.
İlgili kişi: Ld
Tel: +8613480985156
